LE-клетки при системной красной волчанке

Клетки красной волчанки, или LE-клетки (lupus erythematodes cells, LE-cells), были открыты в 1948 г. Hargraves, Richmond и Morton. Они представляют собой морфологическое проявление иммунологического феномена, характерного для системной красной волчанки (СКВ). Главное в указанном феномене — гибель нейтрофилов и, возможно, других клеток крови. В результате сложных аутоиммунных процессов происходит разрушение клеток, и из их ядерной субстанции (деполимеризованной ДНК) возникают бесструктурные шаровидные образования (гематоксилиновые тельца), которые затем фагоцитируются нейтрофильными лейкоцитами, а также другими клетками крови, способными к фагоцитозу (например, моноцитами). Фагоцитируемая субстанция представляет собой иммунный комплекс, состоящий из антинуклеарного фактора, остатков ядер лейкоцитов и комплемента.

Й. Тодоров (1963) выделяет три фазы клеток красной волчанки: 1) расщепление ядерного вещества лейкоцитов, появление в цитоплазме нейтрофильных лейкоцитов крупных гомогенных масс, окрашивающихся в розовато-фиолетовый цвет; 2) феномен «розетки» — расположение нейтрофилов вокруг более крупных образований, находящихся внеклеточно и еще не поглощенных лейкоцитами; 3) раздробленная ядерная масса, фагоцитированная нейтрофилами, включена в цитоплазму этих клеток, занимает центральную часть клетки и выталкивает ядро на периферию, где оно принимает форму полумесяца или серпа.

Иногда обнаруживаются нейтрофилы, в которых фагоцитированная субстанция не имеет гомогенного характера, а сохраняет структуру хроматана. Это клетки Тарта, их рассматривают как предстадию LE-клеток. Специфичными для системной красной волчанки считают типичные LE-клетки.

Для исследования LE-феномена предложены многочисленные методы, в основе которых лежит инкубация клеток больного в собственной плазме с дополнительным травматическим (механическим, ультразвуковым) воздействием на кровь; в результате из поврежденных ядер клеток освобождаются нуклеопротеины, формируются гематоксилиновые тельца, которые фагоцитируются неповрежденными нейтрофилами в присутствии антинуклеарного фактора.

Методика Харгревеса—Циммера

Принцип. Механическое повреждение лейкоцитов для усиления LE-феномена.

Реактивы: 1) метиловый спирт; 2) краска Романовского—Гимзы или азур-эозин.

Ход исследования. В пробирку набирают 10 мл венозной крови и оставляют при комнатной температуре (можно в термостате при 37 °С) на 2 ч. Свернувшуюся кровь выливают на металлическое сито, поставленное на чашку Петри, и фарфоровым пестиком протирают сгусток. Содержимое чашки Петри переносят в центрифужную пробирку и центрифугируют при 2000 об./мин в течение 5 мин. Надосадочную жидкость удаляют, а из верхнего слоя осадка готовят мазки. Высохшие мазки фиксируют метанолом и окрашивают по принятым в гематологии методикам.

Методика Цинкхама—Конли в модификации Е. Н. Новоселовой

Принцип. Механическое воздействие на кровь, облегчающее образование LE-феномена.

Реактивы. 1) натрия оксалат; 2) краска Романовского—Гимзы или азур-эозин; 3) метиловый спирт для фиксации мазков.

Ход исследования. В пробирку с 10 мг оксалата натрия вносят 10 мл венозной крови, тщательно перемешивают и оставляют стоять на 1,0–1,5 ч при комнатной температуре. Вносят в пробирку 8–10 стеклянных бусинок диаметром 3–4 мм, плотно закрывают пробкой и перемешивают, переворачивая пробирку пробкой то вверх, то вниз в течение 30 мин. Затем отстаивают в течение 1 ч при комнатной температуре для разделения слоев. Плазму отсасывают пастеровской пипеткой и вносят в центрифужную пробирку. Центрифугируют при 1000 об./мин в течение 5 мин. Надосадочную жидкость удаляют, а из осадка готовят мазки. Высохшие мазки фиксируют в метиловом спирте и окрашивают гематологическим красителем.

Нормальные величины. У здоровых людей LE-клетки в крови отсутствуют.

Клиническое значение. LE-клетки обнаруживаются у 70–80 % больных системной красной волчанкой, в период активного проявления болезни. Их количество может достигать 10–20 клеток и более на 1000 нейтрофилов (Насонова В. А., Астапенко М. Г., 1989). Исследование целесообразно проводить до начала специфической терапии. Отрицательный результат исследования не отвергает диагноз: это возможно в ранний период заболевания, при большой потере белка с мочой. Небольшое количество LE-клеток обнаруживается при хроническом активном гепатите, смешанном заболевании соединительной ткани, лекарственной СКВ, узелковом периартериите, дерматомиозите, а единичные — при системном ревматоидном артрите.